این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش‌های آسیب‌ شناسی زیستی، جلد ۱۳، شماره ۴، صفحات ۰-۰
عنوان فارسی بیان توالی بهینه شده ژن زیرواحد اصلی فاکتور کلونیزاسیون I اشریشیا کولی انتروتوکسیژنیک (ETEC)
چکیده فارسی مقاله هدف: اشریشیا کولی انتروتوکسیژنیک به‌عنوان مهم‌ترین عامل اسهال و مرگ و میر در کودکان در کشورهای در حال توسعه شناخته شده است. این باکتری سالانه موجب مرگ 300 تا 500 هزار کودک زیر 5 سال می‌شود. به دلیل درمان مشکل و شیوع زیاد آن، طراحی یک واکسن مؤثر علیه این ارگانیسم از اهداف سازمان بهداشت جهانی است. پروتئین CfaB به‌عنوان زیرواحد اصلی فیمبریه، نقش مهمی در اتصال باکتری به سلول‌های پوششی روده دارد و آنتی‌بادی‌های تولید شده علیه این پروتئین می‌تواند از اتصال باکتری به سطح بافت پوششی جلوگیری کند. از این رو این مولکول به تنهایی یا با سایر عوامل حدت‌زا در طراحی واکسن علیه این ارگانیسم مورد توجه بسیاری از محققین است. در این مطالعه، بیان فاکتور کلونیزاسیون B با هدف مطالعه ایمونوژنیسیته این پروتئین به‌عنوان جزئی از کاندیدای واکسن انجام شد. مواد و روش‌ها: ژن cfaB با روش PCR، تکثیر و در ناقل pET28a همسانه‌سازی و بیان آن بررسی شد. با توجه به عدم بیان این ژن به‌علت وجود کدون‌های نادر، ژن cfaB با استفاده از کدون‌های متداول در اشریشیا کولی بهینه‌سازی و مجدداً در ناقل pET28a همسانه‌سازی و بیان شد. نتایج: حضور باند 20 کیلودالتونی در ژل SDS-PAGE، بیان پروتئین CfaB را نشان می‌داد که با روش ایمنو بلات با آنتی‌بادی anti-His tag و آنتی‌بادی ضد CfaB، تأیید و با ستون کروماتوگرافی تمایلی نیکل تخلیص شد. نتیجه‌گیری: بهینه‌سازی کدون و بیان در میزبان‌های هترولوگ یک روش مفید در تولید پروتئین‌های نوترکیب به مقدار زیاد است.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله اشریشیا کولی انتروتوکسیژنیک، فاکتور کلونیزاسیون نوع I، بیان،
عنوان انگلیسی Expression of optimized gene of Enterotoxigenic Escherichia coli CFA/I major subunit
چکیده انگلیسی مقاله Objective: Enterotoxigenic Escherichia coli is considered as the most important agent of children diarrhea and mortality in developing countries. This bacterium causes 300-600 thousands of deaths in the children under 5 years of age per year. With difficulties in treatment as well as its wide prevalence, designing an effective vaccine against this microorganism is the objective of world Health Organization (WHO). The CfaB protein as immunogen and major subunit of fimberia has a critical role in the bacterial attachment to small intestine epithelium and the produced antibody against this protein can prevent attachment of bacterium to epithelial surface. Hence, this molecule alone or with other virulent factors has been considered by many researchers in vaccine designing. In this study, expression of colonization factor B with the aim of studying the immunogenesity of this protein as a component of vaccine candidate was performed. Materials and Methods: cfaB gene was amplified by PCR and cloned into pET28a and its expression was evaluated. Since there was no expression, which was due to presence of rare codon, the cfaB gene was again cloned into pET28a using codon bias in E.coli and subsequently expressed. Results: Presence of a 20KD band on SDS-PAGE gel indicated the expression of CfaB protein, which was later confirmed by immunoblotting with anti-His tag and anti CfaB antibodies and purified on Ni-NTA column. Conclusion: Codon optimization and expression in heterologous hosts is a useful approach for obtaining large quantities of recombinant protein.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله زهرا احصایی | zahra ehsaei
biology science dept., basic science faculty, imam hossein university, tehran, iran.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

جعفر سلیمیان | jafar salimian
biology dept,- basic sciences faculty- imam hossein univ. -babaie high way- tehran- iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

شهرام نظریان | shahram nazrian
biology science dept., basic science faculty, imam hossein university, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

میثم منصوری | maysam mansouri
biology science dept., basic science faculty, imam hossein university, tehran, iran.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

جعفر امانی | jafar amani
applied biotechnology centre, baqiyatallah university of medical sciences.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

راضیه خالصی | raziyeh khalesi
. biology science dept., basic science faculty, imam hossein university, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

سیدمحمد موذنی | seyed mohammad moazzeni
immunology dept., medical science faculty, tarbiatmodares university, tehran, iran.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

نشانی اینترنتی http://mjms.modares.ac.ir/article_6162_b0309bb51d325edc85a290ff0dfe5340.pdf
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده 1
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات