این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش‌های آسیب‌ شناسی زیستی، جلد ۱۳، شماره ۲، صفحات ۱-۱۰
عنوان فارسی کلون، بیان، تخلیص و بررسی آنتی‏ژنیسیته ترکیب پروتئینی UreB۳۳۲-HpaA هلیکوباکتر پیلوری
چکیده فارسی مقاله هدف: هلیکوباکتر پیلوری باکتری گرم منفی با انتشار وسیع است که موجب آلودگی معده و دئودنوم در انسان‏ها می‏شود. امروزه برخی درمان‏های آنتی‏بیوتیکی برای درمان عفونت در دسترس هستند اما هزینه زیاد، عدم تمایل بیماران برای مصرف دقیق دارو و بروز سویه‏های مقاوم از عوامل محدود کننده کفایت این درمان‏ها به‏شمار می‏روند. از این رو تلاش‏های روبه افزایشی در جهت تولید واکسن مؤثر برای این عفونت صورت گرفته است. هدف این تحقیق ساخت ناقل نوترکیب حامل ترکیب قطعه‏ای از زیر واحد بتای آنزیم اوره‏آز (UreB332) و ادهزین A هلیکوباکتر پیلوری (HpaA)، بیان آن در میزبان بیانی (E.coli BL21) و همچنین بررسی آنتی‏ژنیسیته آن به‏عنوان کاندیدای مناسبی برای طراحی واکسن علیه هلیکوباکتر پیلوری است. مواد و روش‏ها: ژن‏های کد کننده ureB332 و hpaA از ژنوم سویه استاندارد هلیکوباکتر پیلوری به روش PCR جدا شده و با هضم آنزیمی به داخل ناقل pET28a وارد و سپس به داخل میزبان‏های کلون‏سازی و بیانی وارد شد. پس از تأیید بیان، ترکیب پروتئینی به روش کروماتوگرافی تمایلی توسط رزین نیکل تخلیص و سپس آنتی‏ژنیسیته آن به روش لکه گذاری وسترن بررسی شد. نتایج: نتایج هضم آنزیمی، PCR و تعیین توالی نشان داد که ژن هدف به درستی در ناقل مورد نظر کلون شده است. این پروتئین نوترکیب توسط آنتی بادی چند تبار خرگوشی ضد هلیکوباکتر پیلوری و سرم انسان آلوده به این باکتری شناسایی شد. نتیجه‏گیری: با توجه به نتایج حاصل از این تحقیق می‏توان این ترکیب آنتی‏ژنی را به‏عنوان کاندیدای مناسبی برای بررسی‏های بعدی در مورد واکسن هلیکوباکتر پیلوری معرفی نمود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله HpaA، اوره‏آز، کلون‏سازی، هلیکوباکتر پیلوری،
عنوان انگلیسی Cloning, expression, purification and antigenicity of recombinant UreB332-HpaA fusion protein from Helicobacter pylori
چکیده انگلیسی مقاله Objective: Helicobacter pylori is a widely distributed Gram negative bacterium that infects the human stomach and duodenum. Some antibiotic regimens are subjected to cure the infection but the cost of drugs, poor patient compliance and emerging of antibiotic-resistant strains are limiting the usefulness of these antibiotic therapies. Therefore, interest in developing a H. pylori vaccine is growing up rapidly. The aim of this study was to construct a recombinant vector containing fusion genes encoding a fragment of B subunit from Helicobacter pylori (H. pylori) urease (UreB332) and Helicobacter pylori adhesion A (HpaA) and expressed it in E. coli BL21, as well as determining its antigenicity as a vaccine candidate of H. pylori. Materials and Methods: The target genes encoding UreB332 and HpaA amplified from standard H. pylori chromosome by PCR, digested by restricted endonuclease enzyme and inserted into the prokaryotic expression vector pET28a(+) which was digested by corresponding restricted endonuclease enzyme. The target fusion protein was expressed in the BL21 (DE3) E.coli. Furthermore, UreB332-HpaA antigenicity was studied by western blotting after Ni-NTA agarose resin purification. Results: Enzyme digestion analysis, PCR and sequencing showed that the target genes were inserted correctly into the recombinant vector. The fusion protein UreB332-HpaA was recognized by the rabbit anti H. pylori polyclonal antibody and the human sera infected with H. pylori. Conclusion: Our results in addition to favorable properties of HpaA and UreB antigens, support the application of rUreB332-HpaA fusion protein, as a good candidate for the development of H. pylori vaccine.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Cloning, Helicobacter pylori, HpaA, Urease
نویسندگان مقاله بهاره حاجی خانی |
ph.d. student, department of bacteriology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

شاهین نجار پیرایه | najar peerayeh
associated professor, department of bacteriology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

حوریه سلیمان جاهی |
associated professor, department of virology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

زهیر محمد حسن | zuhair mohammad
professor, department of immunology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

نشانی اینترنتی http://mjms.modares.ac.ir/article_6145_c40e1a23d48abb9376b32805edaeeb2a.pdf
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات