این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش‌های آسیب‌ شناسی زیستی، جلد ۸، شماره ۱، صفحات ۳۷-۴۴
عنوان فارسی ساخت پلاسمید بیان‌کننده پروتئین نوترکیب تحت القای حرارتی در اشریشیاکلی
چکیده فارسی مقاله هدف: در بیان عامل تحریک‌کننده رده گرانولوسیت- ماکروفاژ انسانی (hGM-CSF)، در اشریشیاکلی تحت القای حرارتی، بر پایه پلاسمید pBC(SK)، که اختلاف آنها در حضور یا عدم حضور توالی خاتمه دهنده نسخه‌برداری در پایین دست توالی کدکننده است پروتئین نوترکیب، ساخته شد. مواد و روش‌ها: دو پلاسمید بیان‌کننده حاوی یک قطعه 75 جفت بازی از پروموتور باکتریوفاژی PL، یک ژن جهش یافته از رپرسور CI (57CI)، برای کنترل فعالیت پروموتور، که محصول آن حساس به حرارت است و یک ترادف نشانه PelB به منظور هدایت پروتئین نوترکیب به فضای پریپلاسمی است. توانایی پلاسمیدهای ساخته شده با بیان hGM-CSF تحت القای حرارتی در اشریشیاکلی آزمایش شده است. نتایج: نتایج حاصل از آنالیز پروتئین‌های باکتری‌های نوترکیب (1TG) حاوی هر یک از دو پلاسمید نوترکیب بعد از شوک حرارتی بر بیان و پردازش کامل GM-CSF انسانی نوترکیب در فضای پریپلاسمی کلون‌های به‌دست آمده دلالت دارد. با هدف افزایش کاربردی پلاسمید حاوی خاتمه دهنده رونویسی برای بیان دیگر پروتئین‌های نوترکیب تحت القای حرارتی، توالی کلون‌سازی چندگانه‌ای (MCS) شامل یازده جایگاه برشی منحصر به فرد به این پلاسمید افزوده شد. نتیجه‌گیری: پلاسمیدهای ساخته شده در این تحقیق ابزارهای مناسبی را برای انجام مطالعات مربوط به بیان پروتئین‌های نوترکی در اشریشیاکلی فراهم کرده‌اند.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Construction of an Escherichia coli-specific heat-inducible expression plasmid
چکیده انگلیسی مقاله Purpose: In order to express human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) under heat shock. Materials and Methods: Two expression plasmids were constructed based on pBC(SK) plasmid. The expression cassettes in the two plasmids are equipped with a 75 base pair fragment, derived from the PL promoter of the bacteriophage lambda (λ). The plasmids also contain a temperature mutant of repressor coding gene (CI857) to regulate the promoter activity. The two plasmids differ from each other in having a transcription termination signal or not, down stream to the recombinant gene in the expression cassette. A pelB signal sequence was also used in order to have the recombinant protein in the periplasmic space of Escherichia coli. The efficiency of the constructed plasmids was demonstrated by heat-regulated expression of hGM-CSF. Results and Discussion: The protein analysis of the recombinant bacteria, containing either of the two plasmids, indicates a successful expression and complete processing of the hGM-CSF precursor, following the heat shock activation of the λPL promoter. In order to enhance the applicability of the terminator containing plasmid, for the expression of other proteins of interest by heat regulation, a multiple cloning site including eleven unique restriction sites was inserted in the plasmids. The heatregulated plasmids, designed in this work, have provided suitable tools to study the expression of recombinant proteins under temperature up-shift in Escherichia coli, when the use of chemical inducers are not desirable.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله فریبا عطایی |
m.sc. graduate, national institute for genetic engineering and biotechnology

حسین قنبریان |
m.sc. graduate, medical biotechnology department, medical science faculty, tarbiat modares university, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

علیرضا زمردی پور | ali reza
faculty member, national institate for genetic engineering and biotechnology

باقر یخچالی |
faculty member, national institate for genetic engineering and biotechnology

نشانی اینترنتی http://mjms.modares.ac.ir/article_6184_c080d9c68de0b8843a2f9b05ee54e7b5.pdf
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات