|
|
پژوهش در پزشکی، جلد ۳۷، شماره ۱، صفحات ۱-۷
|
|
|
| عنوان فارسی |
جداسازی و ایمنوفنوتایپینگ سلولهای اپیتلیالی پرده آمنیون |
|
| چکیده فارسی مقاله |
چکیده سابقه و هدف: سلولهای اپیتلیال پرده آمنیون (hAECs) جمعیت هتروژنی با توانایی تمایز به سه رده سلولی لایه ژرمینال هستند. هدف این مطالعه بهبود روش-های جداسازی و اینمونوفنوتایپینگ سلولهای بنیادی تخلیص شده با استفاده از پنلی از آنتیبادیهای ضد مارکرهای بنیادی بود. روش بررسی: چهار واحد جفتی از مادرانی که تحت جراحی سزارین انتخابی بوده و هنوز نه ماه بارداری کامل نشده بود تهیه گردید و در شرایط استریل و با حفظ زنجیره سرمایی به آزمایشگاه منتقل شد. پرده آمنیون به صورت مکانیکی از لایه کوریون جدا شده و با استفاده از trypsin- EDTA هضم آنزیمی گردید و سوسپانسیون سلولی به دست آمده جمع آوری شد و پس از چند بار شستشو با استفاده از مارکر اپیتلیالی سایتوکراتین از لحاظ درصد خلوص بررسی گردید. سپس سلولهای به دست آمده از نظر بیان مارکرهای CD29, CD9, CD34, CD45, CD44, CD133, CD73, CD105, CD38, CD10 MHC-I, MHC-II, HLA-G, SSEA-4, STRO و OCT-4 با استفاده از فلوسایتومتری مورد بررسی قرار گرفت. یافتهها: تعداد 80-130 میلیون سلول، بسته به کیفیت و اندازه پرده آمنیون از هر واحد جفتی به دست آمد. بیان 90 درصدی مارکر سایتوکراتین نشان دهنده درصد خلوص بالای این سلولها بود. بررسی فلوسایتومتری سلولها نشان داد این سلولها از نظر بیان مارکرهای CD9, CD10, CD29, CD73, CD105, HLAI, HLA-G, OCT-4, SSEA-4 و STRO مثبت بوده که نشان دهنده بنیادی بودن این سلولها می باشد. این سلولها از نظر بیان مارکرهای CD34, CD38, CD44, CD45, HLA-DR و CD133 منفی بودند. نتیجهگیری: نتایج حاصل از ایمونوفنوتایپینگ نشان داد که سلولهای hAECs مارکرهای زیادی را بیان میکنند که با سلولهای بنیادی جنینی مشترک می باشد و به نظر میرسد که بتوان به عنوان منبع جدیدی از سلولهای بنیادی در کاربردهای درمانی استفاده شود. واژگان کلیدی: جفت، سلول بنیادی، پرده آمنیون، سلول اپیتلیال. |
|
| کلیدواژههای فارسی مقاله |
واژگان کلیدی، جفت، سلول بنیادی، پرده آمنیون، سلول اپیتلیال. |
|
| عنوان انگلیسی |
Isolation and Immunophenotypjng of human amniotic epithelial cells |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Abstract Background: Human amniotic epithelial cells (hAECs) have been introduced as a valuable source of stem cells with therapeutic applications. Despite the extensive study and emerging evidence, cell surface marker signature of hAECs remained controversial. The aim of the present study was to establish an efficient and optimized isolation procedure of hAECs and their characterization in terms of proliferation and stem cell markers. Materials and methods: Four human placentas were collected from healthy women undergoing elective caesarian delivery at term labor under sterile condition. Amniotic membranes were carefully isolated and subjected to trypsin digestion. Single cell suspensions were obtained and the epithelial origin was confirmed by assessment of cytokeratin expression. Expression of CD9, CD10, CD29, CD34, CD38, CD44, CD45, CD73, CD105, CD133, MHC-I, HLA-DR, HLA-G, SSEA-4, STRO-1 and OCT-4 was then evaluated by flow cytometry. Results: The overall yield of hAEC ranged from 80-130×106 cells per placenta with more than 98% viability. Microscopic examination revealed that hAECs are large and refractive cells with great capacity to adhere to plastic surfaces. The cells substantially expressed cytokeratin implying their epithelial origin. Flow cytometry data revealed that hAECs are a heterogenic population consisting of immune phenotypically mixed cells. Nearly all purified cells expressed mesenchymal markers, CD9, CD10, CD29, and CD73. A large proportion of cells also expressed HLA-I, HLA-G, STRO-1, OCT-4 and SSEA-4. Isolated cells, however, failed to express CD34, CD38, CD44, CD45, CD105, CD133 and HLA-DR. Conclusion: The procedure presented here is a simple and cost-effective protocol for isolation of a large numbers of viable hAECs. Surface markers and such features as proliferation capacity of hAECs are among the characteristics that are strongly dependent upon isolation and cell culture conditions. Thus such variables should be taken in to consideration when stem cell properties of hAECs are to be interpreted. Keywords: Placenta, Stem cell, Amniotic membrane, Epithelial cells, Immunophenotype. |
|
| کلیدواژههای انگلیسی مقاله |
|
|
| نویسندگان مقاله |
معراج طباطبایی | meraj tabatabaei
department of immunology, faculty of medicine, shahid beheshti university of medical , tescienceshran, iran
گروه ایمونولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی (Shahid beheshti university of medical sciences)
امیر حسن زرنانی | amir hossein zarnani
2 department of immunology, faculty of medicine, tarbiat modarres university, tehran, iran 3 fertility research center, ebn sina institute, tehran, iran
گروه ایمونولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس تهرانمرکز تحقیقات باروری، پژوهشگاه ابن سینا
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)
شهره نیکو | shohreh nikoo
nano biotechnology center, ebn sina institute, tehran, iran
مرکز نانو بیوتکنولوژی، پژوهشگاه ابن سینا
بهاره کشاورزی | bahareh keshavarzi
department of immunology, faculty of medicine, shahid beheshti university of medical , tescienceshran, iran
گروه ایمونولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی (Shahid beheshti university of medical sciences)
فهیمه رمضانی تهرانی | fahimeh ramzani tehrani
immunology research center, tehran university of medical sciences, tehran, iran
مرکز تحقیقات ایمونولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تهران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)
سهیلا عارفی | soheila arefi
reproductive endocrinology research center, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran
مرکز تحقیقات اندوکرینولوژی تولیدمثل، دانشگاه علوم پزشکی شهیدبهشتی
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی (Shahid beheshti university of medical sciences)
ابراهیم میرزادگان | ebrahim mirzadegan
department of immunology, faculty of medicine, tarbiat modarres university, tehran, iran
گروه ایمونولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس تهران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)
نریمان مصفا | nariman mosaffa
department of immunology, faculty of medicine, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran
گروه ایمونولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی (Shahid beheshti university of medical sciences)
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-652&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
ایمنیشناسی، ایمونولوژی |
| نوع مقاله منتشر شده |
پژوهشی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|