این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
Iranian Journal of Veterinary Research، جلد ۱۶، شماره ۳، صفحات ۳۰۱-۳۰۵
عنوان فارسی اختلال ژنی در سالمونلا تیفی موریوم به روش λ red disruption تغییر یافته
چکیده فارسی مقاله تکنیک‌های زیادی برای غیر فعال کردن هدفمند ژن‌ها در باکتری‌ها وجود دارد که بعضی از آن‌ها در گونه‌های سالمونلا به کار برده شده است. در این مطالعه ترکیبی از SOEing PCR method و λ red disruption system برای حذف ژن phoP در سالمونلا تیفی موریوم بومی و استاندارد استفاده شد. سه واکنش استاندارد واکنش زنجیره‌ای پلیمراز و یک واکنش فیوژن واکنش زنجیره‌ای پلیمراز برای ساخت یک DNA خطی شامل بالادست و پایین دست ژن phoP و کاست کانامایسین انجام شد. به عنوان پلاسمید الگو از پلاسمید pKD4 استفاده شد که دارای ژن مقاومت به کانامایسین با نواحی FRT (جایگاه شناسایی FLP) در دو طرف می‌باشد. محصول خطی به دست آمده به سلول‌های صلاحیت‌دار سالمونلا تیفی موریوم الکتروپوریت شد. فقط تعدادی کلنی مربوط به سویه استاندارد ترانسفورمه روی LB آگار کانامایسین‌دار مشاهده شد و هیچ کلنی مربوط به سویه بومی بر روی این محیط پدیدار نشد. عدم موفقیت در ترانسفورمه کردن سویه بومی ممکن است به دلیل عدم سازگاری سیستم λ red disruption در این سویه و یا سیستم‌های restriction-modification ناشناخته باکتری بومی مورد آزمایش باشد. با این حال با استفاده از این محصول خطی می‌توان از گونه‌های مختلف سالمونلا سویه‌های موتان phoP به دست آورد که این به دلیل همولوژی زیاد این ژن در انواع سالمونلا می‌باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Gene disruption in Salmonella typhimurim by modified λ Red disruption system
چکیده انگلیسی مقاله There are many techniques to knock out directed genes in bacteria, some of which have been described in Salmonella species. In this study, a combination of SOEing PCR method and the λ Red disruption system were used to disrupt phoP gene in wild type and standard strains of Salmonella typhimurium. Three standards PCR and one fusion PCR reactions were performed to construct a linear DNA including upstream and downstream of phoP gene and Kanamycin cassette. As a template plasmid, we used pKD4 whichcarries kanamycin gene flanked by FRT (FLP recognition target) sites. The resulting construct was electroporated into prepared competent cells of S. typhimurium. The transformants colonies related to the standard strain appeared on the LB-Km-agar plates after incubation, but there was no colony on LB-Km-agar plates corresponding to the wild type strain. The failure in transformation of the wild type strain may be because of inflexibility of the λ Red disruption system in this strain or its unique restriction-modificationsystem. However, by this construct we are able to generate phoP mutant in many of the Salmonella species due to high homology of the phoP gene which exists in different species.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله a آهنی آذری | ahani azari
department of microbiology, faculty of veterinary medicine, university of tehran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)

t زهرایی صالحی | zahraei salehi
department of microbiology, faculty of veterinary medicine, university of tehran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)

b نیری فسایی | nayeri fasaei
department of microbiology, faculty of veterinary medicine, university of tehran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)

m آل بویه |
basic and molecular epidemiology of gastrointestinal disorders research center, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی (Shahid beheshti university of medical sciences)

نشانی اینترنتی http://ijvr.shirazu.ac.ir/article_3200_10ec782f97f2ef729cff88440ebf65e7.pdf
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات