این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
طب جنوب، جلد ۱۱، شماره ۲، صفحات ۹۸-۱۰۷
عنوان فارسی تأثیر توالی کوزاک در بیان موقت مینی‌ژنی از فاکتور ۹ انعقادی در سلول‎های پستاندار
چکیده فارسی مقاله زمینه: قابلیت توالی کوزاک در افزایش بیان ژن های یوکاریوتی مشخص شده است. با توجه به این موضوع می توان از این توانمندی در جهت افزایش بیان پروتئین های نوترکیب استفاده کرد. مواد و روش‌ها: با هدف بالا بردن بیان ژن فاکتور IX انعقادی، سازه ای بیانی مجهز به پروموتر سایتومگالو ویروس انسانی (CMV) که بیان یک مینی ژن فاکتور IX را تحت کنترل داشت، به توالی کوزاک تجهیز شد. پس از تأیید صحت سازه نوترکیب، این سازه به همراه یک سازه بیان کننده فاکتور IX فاقد کوزاک (به عنوان کنترل مثبت) و یک پلاسمید pcDNA3 (به عنوان کنترل منفی) برای ترانسفکشن سلول های تخمدان هامستر چینی (CHO) در سه آزمایش مستقل مورد استفاده قرار گرفتند. محیط کشت سلول های ترانسفکت شده به منظور آشکارسازی بیان فاکتور IX انسانی پس از 2 و 3 روز جمع آوری و مورد آزمون یک مرحله ای انعقاد قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج بدست آمده در مقایسه با کنترل منفی بیانگر بیان فاکتور IX فعال توسط دو گروه سلول های ترانسفکت شده با پلاسمید‎های نوترکیب بود. مقایسه ابتدایی میزان بیان دو گروه سلول های ترانسفکت شده با دو سازه نوترکیب، نشانگر افزایش بیان توسط سلول هایی است که حاوی توالی کوزاک هستند. نتیجه گیری: علاوه بر تأیید نقش افزاینده کوزاک بر بیان فاکتور IX، در این طرح با ساخت پلاسمیدهای بیانی ابزار مناسبی برای مطالعه سیستماتیک بیان فاکتور IX انسانی فعال فراهم شد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله توالی کوزاک، ژن‌های یوکاریوتی، پروتئین نوترکیب، فاکتور IX
عنوان انگلیسی Effect of the Kozak sequence on transient expression of human coagulation factor IX (FIX) minigene in mammalian cells
چکیده انگلیسی مقاله Background: The positive effect of Kozak sequence on the translational efficiency of the eukaryotic genes has been noted and can be used in order to increase recombinant protein expression. Methods: A CMV-regulated human factor IX (hFIX) –expressing plasmid containing factor IX minigene– equipped with the Kozak sequence was constructed. After verification, the constructed plasmid which was in parallel with a Kozak-less hFIX-minigene expressing plasmid (the positive control) and a parental plasmid (pcDNA3) as the negative control were used to transfect Chinese Hamster Ovary (CHO) cells, separately. The expression of the recombinant hFIX (rhFIX) was evaluated by performing one-stage coagulation test on the cultured media collected from the transfected cells after 2 and 3 days. Results: This study indicated the expression of biologically active hFIX by cells transfected with either of the recombinant plasmids in comparison with negative control. The data also shows a higher coagulation activity in the cultured media taken from the cells transfected with the Kozak: hFIX-minigene compared to that of the cells transfected with the Kozak-less hFIX-minigene. Conclusion: In addition to confirming the positive effect of Kozak sequence on the translational efficiency of the eukaryotic genes, the constructed plasmids provide new tools for systematic analysis of the ability of the transfected cells for the production of biologically active hFIX.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله علی اکبر حداد مشهدریزه | aliakbar hadad mashhadrizeh


محمدرضا سام | mohamad reza saam


صدیقه صفری | sedigheh safary


علیرضا زمردی پور | alireza zomorodi pour
تهران، اتوبان تهران کرج، بلوار پژوهش، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، ص. پ 6343-14155
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

سید جواد حسینی | seyed javad hosseini


فرزانه صابونی | farzaneh sabooni


نشانی اینترنتی http://ismj.bpums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3-136&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده عمومی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات