این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
فصلنامه پژوهشی خون، جلد ۸، شماره ۱، صفحات ۴۲-۵۱
عنوان فارسی توسعه روش NASBA-ELISA برای تشخیص HIV-۱ RNA
چکیده فارسی مقاله چکید ه سابقه و هدف با شروع عفونت HIV-1 ، اولین مارکری که در خون آشکار می‌شود، RNA ویروسی می‌باشد. از میان روش‌های موجود که شناسایی RNA را هدف قرار می‌دهند؛ متداول‌ترین روش‌ها NASBA و RT-PCR هستند. NASBA مزیت‌های متعددی نسبت به RT-PCR ارایه می‌کند. در این پژوهش، واکنش NASBA در ترکیب با روش آشکارسازی آسان و حساس الایزا، برای تشخیص و آشکارسازی HIV-1 RNA مورد استفاده قرار گرفت. مواد و روش‌ها نوع مطالعه انجام شده از نوع بنیادی ـ کاربردی بود. با وارد کردن نوکلئوتید 11-dig-UTP در مخلوط واکنش NASBA ، RNA نشاندار تولید شد. آن‌گاه محصولات نشاندار NASBA در فاز مایع به یک پروب اختصاصی متصل به بیوتین هیبرید شدند. سپس هیبریدهای حاصل به یک پلیت پوشیده شده با استرپتواویدین منتقل شده، پس از اعمال شستشوها و خارج کردن محصولات غیر اختصاصی از محیط واکنش، آشکارسازی نهایی با اضافه کردن کونژوگه آنتی دیگوکسی ژنین ـ آنزیم و سوبسترای آن صورت گرفت. یافته‌ها نتایج به دست آمده نشانگر کارآیی واکنش NASBA در تکثیر ناحیه مورد نظر از ژنوم ویروس بود و آشکارسازی محصولات NASBA بر روی ژل آگاروز منحصراً یک باند 176 نوکلئوتیدی مربوط به هدف را نشان می‌داد. با به کارگیری روش الایزا در آشکارسازی محصولات NASBA ، برای غلظت 01/0 مایکرو مولار پروب، OD برابر با 11/0 ± 049/1 به دست آمد. نتیجه گیری در این مطالعه با به کارگیری آغازگر و پروب مناسب، روش تشخیصی NASBA-ELISA با حساسیت و اختصاصیت بالا برای HIV-1 راه‌اندازی شد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله NASBA ، الایزا، ایمونواسی، HIV-1
عنوان انگلیسی Development of NASBA-ELISA technique for detection of HIV-1 RNA
چکیده انگلیسی مقاله Abstract Background and Objectives Viral RNA is the first blood marker which appears in HIV-1 infection. RT-PCR and NASBA are the commonly used techniques for amplification of RNA. NASBA technique provides more advantages over RT-PCR. In this study, an NASBA assay combined with an easy, sensitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for detection of HIV-1 RNA. Materials and Methods 11-dig-UTP was added to an NASBA reaction mixture and the RNA amplicons were labeled. Then, the dig-labeled NASBA products hybridized to a biotinylated specific probe in hybridization solution buffer and the hybrids were transferred to a streptoavidin-coated plate. After several washing processes and emission of nonspecific products, the final detection of the captured RNA was done by addition of anti-dig antibody-enzyme conjugate and the substrate. Results The results demonstrated that, NASBA is an efficient method for amplification of the target genome. Detection of NASBA products by agarose gel electrophoresis showed a unique 176 bp band corresponding to the specific target. For the detection of NASBA products, an ELISA assay was performed using 0.01 µM probe, the OD of 1.049 ± 0.11 was obtained. Conclusions In this study, by using suitable primers and probe a highly sensitive and specific NASBA-ELISA method for detection of HIV-1 developed.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Nasba, Elisa, Immunoassay, HIV-1
نویسندگان مقاله مریم شهرابی | m. shahrabi
دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس

مهدی فروزنده | m. forouzandeh
دانشیار دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس

فرزانه صباحی | f. sabahi
دانشیار دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس

مهدی پریان | m. paryan
دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس

نشانی اینترنتی http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-250-2&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده biotechnology|
نوع مقاله منتشر شده 1
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات