این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
فصلنامه پژوهشی خون، جلد ۵، شماره ۴، صفحات ۲۲۵-۲۳۵
عنوان فارسی شناسایی دقیق حذف‌های ناشناخته خوشه ژنی بتاگلوبین در ناقلین بتا تالاسمی با استفاده از دو روش Real-time PCR و MLPA
چکیده فارسی مقاله چکید ه سابقه و هدف بتا تالاسمی به طور عمده از جهش‌های نقطه‌ای یا حذف‌های کوچک ناشی می‌شود ولی مواردی از وجود حذف‌های بزرگ در خوشه ژنی بتاگلوبین مشاهده شده است. شناسایی حذف‌های شناخته شده مبتنی بر روش Gap PCR می‌باشد در حالی که حذف‌های ناشناخته با این روش شناسایی نمی‌شوند. برای فایق آمدن بر این محدودیت، دو روش کمی Real-time PCR و MLPA برای بررسی کمی خوشه ژنی بتاگلوبین به کار گرفته شد. مواد وروش‌ها در این مطالعه که به صورت مورد - شاهدی انجام شد، به روش سرشماری 40 فرد ناقل مشکوک به حذف در خوشه ژنی بتاگلوبین که دارای شاخص‌های خونی کاهش یافته( pg 27 MCH < ، fl 80 < MCV )، هموگلوبین A2 نرمال و هموگلوبین F افزایش یافته یا نرمال بودند وارد مطالعه شدند. تعداد نسخه‌های ژنی با به کارگیری روش Real-time PCR و روش مقایسه‌ای چرخه آستانه، مورد بررسی قرار گرفت. هم چنین تعداد نسخه‌های ژنی با روش MLPA نیز ارزیابی شد. یافته‌ها نتایج حاصل از Real-time PCR برای ژن‌های HBB ، HBD و HBG2 با استفاده از روش بررسی مقایسه‌ای چرخه آستانه، میزان – ΔΔ Ct 2 را برای افراد سالم، 18/0 ± 96/0 و برای ناقلین حذف در خوشه ژنی بتاگلوبین، 04/0 ± 58/0 نشان داد. هم چنین نتایج حاصل از MLPA ، کاهش حدود 50% در ارتفاع پیک شناساگرهای تکثیر یافته مرتبط با ژن حذف شده در افراد هتروزیگوت را نشان داد. نتیجه گیری نتایج MLPA و بررسی پیک‌های حاصل از تکثیر شناساگر، وجود حذف را در مناطقی که توسط Real-time PCR شناسایی شده بود، تایید کرد. با کمک این دو روش می‌توان حذف‌های شناخته شده و ناشناخته را در ناقلین بتا تالاسمی با دقت زیاد شناسایی نمود. کلمات کلیدی : بتا تالاسمی، بتاگلوبین، حذف ژنی
کلیدواژه‌های فارسی مقاله بتا تالاسمی، بتاگلوبین، حذف ژنی
عنوان انگلیسی Accurate detection of unknown deletions in beta-Globin gene cluster in beta thalassemia carriers using Real-time PCR and MLPA
چکیده انگلیسی مقاله Abstract Background and Objectives Although beta thalassemia is mainly caused by mutations involving single base substitutions and small deletions, there have been reports showing deletions of large regions of beta- globin genes play a similar causing role. The strategy to identify beta thalassemia carriers with known deletions is based on PCR techniques such as Gap PCR. There are however some unknown deletions that can not be detected by the above methods. To overcome this limitation, Real-time PCR and MLPA were developed as two quantitative assays for analysis of beta-globin gene cluster. Materials and Methods The subjects were evaluated in a case-control study. Among individuals referred to genetic laboratories of Pasteur Institute of Iran and Kawsar Genetic Research Center, 40 were suspected of having a large deletion in β-globin gene cluster. The including criteria were hematological findings such as low blood indices (MCV < 80 fl and MCH < 27 pg), normal HbA2 and raised or normal HbF. Genomic DNA was extracted from peripheral blood. A Real-time PCR assay was developed using comparative threshold cycle (Ct) method for analysis of gene copy number. In addition, gene dosage was analyzed using MLPA method. Results Real-time PCR results for quantitative analysis of Beta, Delta, G-gamma genes showed the ratio (2-ΔΔCt) of 0.96 ± 0.18 for normal individuals and 0.58 ± 0.04 for carriers of deletions in beta globin gene cluster. MLPA results showed nearly 50% reduction in the height of the peaks corresponding to regions of deletions. Conclusions MLPA results confirmed the presence of the same deletions detected by Real-time PCR in all of the carrier individuals. It would be ideal to combine these quantitative assays to confirm corresponding results for accurate diagnosis of known and unknown deletions in beta thalassemia carriers. Key words : beta-Thalassemia, beta-Globins, Gene Deletion
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله beta-Thalassemia, beta-Globins, Gene Deletion
نویسندگان مقاله صادق باباشاه | s. babashah
واحد علوم و تحقیقات دانشگاه آزاد اسلامی
سازمان های دیگر: مركز تحقيقات بيوتكنولوژي انستيتو پاستور ايران

سمیه جمالی | s. jamali
مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی انستیتو پاستور ایران

رضا مهدیان | r. mahdian
مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی انستیتو پاستور ایران

مینا حیات نوسعید | m hayat nosaeid
مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی انستیتو پاستور ایران

مرتضی کریمی پور | m. karimipoor
مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی انستیتو پاستور ایران

فرشته مریمی | f. maryami
مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی انستیتو پاستور ایران

مرضیه رییسی | m. raeisi
مرکز تحقیقات ژنتیک انسانی کوثر

راحله علی محمدی | r. alimohammadi
واحد علوم و تحقیقات دانشگاه آزاد اسلامی

سیروس زینلی | s. zeinali
مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی انستیتو پاستور ایران
سازمان های دیگر: مركز تحقيقات ژنتيك انساني كوثر

نشانی اینترنتی http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-34-3&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده 1
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات