این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
فصلنامه پژوهشی خون، جلد ۳، شماره ۳، صفحات ۲۲۱-۲۳۲
عنوان فارسی تهیه مواد جایگزین سرم جنین گاو و بررسی اثر آن‌ها بر رشد دودمان‌های سلولی هیبریدومایی و میزان ترشح آنتی‌بادی‌های منوکلونال
چکیده فارسی مقاله چکید ه سابقه و هدف دست‌یابی به منابع جایگزین سرم جنین گاو به عنوان ماده مغذی کشت سلول به علت کمبود این نوع سرم و نیازهای متفاوت سلول‌های مختلف همواره مورد بررسی می باشد . این مطالعه به تهیه مواد مغذی جانشین سرم جنین گاو و بررسی اثر آن‌ها بر رشد سلول‌ها و ترشح آنتی‌بادی‌های منوکلونال توسط دودمان‌های سلولی هیبریدومایی پرداخته‌است. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. پلاکت‌های تاریخ گذشته با گروه‌های مختلف به منظور استخراج عوامل رشد موجود در آن‌ها مورد استفاده قرار گرفتند. پلاسما با گروه AB نیز به سرم تبدیل شد و اثر آن با محیط‌های حاوی سرم جنین گاو، هیپوگزانتین ـ تیمیدین (HT) و1640 RPMI مورد مقایسه قرار گرفت. شاخص‌های رشد مورد ارزیابی شامل شمارش ابتدایی سلول‌ها، Confluency (میزان پر شدن چاهک‌) روزانه و تیتراسیون آنتی‌بادی‌های منوکلونال آنتی A و آنتی B گروه‌های خونی بودند. آنالیز آماری شامل آزمون t تک نمونه‌ای، برازش منحنی رگرسیون چندگانه لگاریتمی و تحلیل عاملی منحنی‌های رشد توسط نرم‌افزار 12 SPSS انجام شد. یافته‌ها چهار ماده مغـذی سـرم AB انسانـی (AB) ، سرم جنین گاو (FCS) ، عصاره پلاکتی انسان (PLT) و مخلوط AB و PLT (ABP) جهت رشد سلول‌های هیبریدومایی موشی تولیدکننده آنتی‌سرم‌های گروه‌های خونی A و B مورد ارزیابی قرار گرفتند و با شاخص‌های رشد در محیط پایه 1640 RPMI مقایسه شدند. بیشترین اثر مثبت بر رشد به ترتیب نزولی عبارت بود از: 1- 5% ABP ، 2- 10% FCS ، 3- 10% ABP ، 4- 5% AB ، 5- 10% AB ، 6- 5% PLT ، 7- 20% ABP ، 8- 10% PLT ، 9- 20% PLT ، 10- هیپوگزانتین ـ تیمیدین و تنها 20% AB مانع رشد گردید. تیتر آنتی A و آنتی B ایجاد شده توسط هیبریدوم‌ها در مقادیر 5 و 10 درصد از PLT ، AB و مخلوط این دو (ABP) نسبت به FCS 5 تا 10 درصد به ترتیب نزولی به صورت زیر به دست آمد: 1- 5% PLT ، 2- 10% PLT ، 5% ABP ،10% ABP ، 10% AB ، 3- 5% AB . نتیجه گیری به طور کلی FCS دارای بیشترین اثر در شیب تکثیر و مرگ و کمترین اثر در مرحله ثبات منحنی رشد سلول‌ها می‌باشد لذا جهت تکثیر سلول‌ها در شمارش پایین مناسب به نظر می‌رسد. سرم AB ، عصاره پلاکتی و مخلوط این دو در مقادیر مناسب دارای شیب کمتر تکثیر نسبت به FCS بوده و باعث طولانی شدن مرحله ثبات و کاهش شیب مرگ می‌گردند (این مواد در غلظت‌های بالا باعث مرگ سلول‌ها می‌شوند). بنابراین ممکن است جهت کشت سلول در سیستم‌های ممتد کشت مناسب باشند. کلمات کلیدی: سرم انسانی، کشت سلول، کینتیک رشد، گروه‌های خونی، تحلیل عاملی
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی preparation of fetal calf serum alternatives and their effects on growth and secretion of hybridoma cell lines
چکیده انگلیسی مقاله Abstract Background and ObjectivesProviding fetal calf serum (FCS) alternatives as cell culture supplements is an important field of research to compensate for the FCS supply shortage.This study focused on preparation of fetal calf serum alternatives and their effects on growth and secretion of hybridoma cell lines.Materials and MethodsOutdated human platelet units undergo extraction for its growth factors to be obtained. Human AB blood group plasma was also converted to serum and its growth effect was compared to FCS, hypoxanthine-thymidine (HT) and RPMI1640 as cell culture media and supplement. Cell growth indices were preliminary counting of cells , confluency as surface area of plates filled with cells, and titration of monoclonal anti-A and anti-B blood group antibodies collected from cultured mouse hybridoma cells. Statistical analysis including one sample t-test, logarithmic multiple regression curve fit, and factor analysis was done by SPSS v12 software. ResultsThe four nutritional supplements of (1) human serum AB (AB), (2) human platelet extract (PLT), (3) equal mixture of AB & PLT (ABP), and (4) fetal calf serum as cell culture were examined on mouse hybridoma anti-A and anti-B monoclonal antibody producer cell lines for cell growth indices and compared with the same indices on RPMI1640 media. The growth-stimulating effects in descending order of values were (1) ABP5% , (2) FCS10% , (3) ABP10% , (4) AB5% , (5) AB10% , (6) PLT5% , (7) ABP20% , (8) PLT10% , (9) PLT20%, and (10)HT but AB20% inhibited growth of mentioned hybridoma cell lines. The titer of anti-A and anti-B monoclonal antibodies produced by cultured hybridoma on 5 and 10 percent concentration of AB , PLT and ABP compared to FCS5-10% at descending order were (1) PLT5%, (2) PLT10% , ABP5% , ABP10% , AB10%, and (3) AB5%. ConclusionsIn general FCS had the following effects on curves of cell growth: (1) the highest increase on slope of multiplication (ascending) phase, (2) the highest increase on slope of death (descending) phase, and (3) the lowest duration of stationary phase. Then, FCS can be appropriate for growth of cells at initial low cell count. Human serum AB, human platelet extract, and equal mixture of both at optimum concentrations (these supplements at high concentrations killed cells) compared to FCS showed (1) decreased slope of multiplication phase, (2) decreased slope of death phase, and (3) increased duration of stationary phase. Thus, AB and PLT may be suitable for continuous cell culture systems in which cell survival during longer times is required. Factor analysis was introduced as a model to evaluate kinetics of cell growth at different supplements. Key words : Human serum, Cell culture, Growth kinetic, Blood groups, Factor analysis
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله دکتر رضا گلستانی | golestani r
دانشگاه تربیت مدرس

دکتر سید محمد موذنی | seyyed mohammad moazzeni s m
دانشگاه تربـیت مـدرس
سازمان های دیگر: مـركز تحقيقـات سازمـان انتقـال خـون ايـران و شـركت پااليـش و پـژوهش خون

دکتر علی اکبر پورفتح اله | a a puorfathollah a a
دانشگاه تربیت مدرس
سازمان های دیگر: مركز تحقيقات سازمان انتقال خون ايران

لطیف حمیدپور | hamidpour l
مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایران
سازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (Blood transfusion research center)
سازمان های دیگر: مركز تحقيقات سازمان انتقال خون ايران

دکتر مجتبی شرفی | sharafi m
مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایران
سازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (Blood transfusion research center)

دکتر زهره عطارچی | attarchi z
مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایران
سازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (Blood transfusion research center)

دکتر بشیر حاجی بیگی | mohammad bashir hadji beygi b
مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایران
سازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (Blood transfusion research center)

فرزانه توسلی | tavasoli f
مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایران
سازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (Blood transfusion research center)

جمشید اسماعیلی | esmaili j
مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایران
سازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (Blood transfusion research center)

سعید ریوندی | reyvandi s
مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایران
سازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (Blood transfusion research center)

نشانی اینترنتی http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-95&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده 1
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات