این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
Iranian Journal of Veterinary Research، جلد ۱۷، شماره ۴، صفحات ۲۳۷-۲۴۲
عنوان فارسی بیان آنتی ژن HA۱ ویروس آنفلوانزای پرندگان (H۵N۱) به عنوان کاندیدای مهم تولید واکسن در سیستم باکتریایی
چکیده فارسی مقاله پاندمی قریب‌الوقوع ویروس آنفلوانزا نیازمند واکسیناسیون جهانی است تا از بروز بیماری و مرگ و میر گسترده ممانعت به عمل آید، اما تولید واکسن‌های سنتی بر علیه این بیماری پروسه‌ای زمانگیر می‌باشد. در این تحقیق، سیستم باکتریایی به منظور بیان و تخلیص پروتئین هماگلوتنین با تاخوردگی مناسب، به عنوان پاسخی سریع در برابر استرین‌های عامل بروز پاندمی توسعه یافت. بنابراین دامین کروی هماگلوتنین نو ترکیب (HA1) ویروس آنفلوانزای H5N1 استرین (A/Indonesia/05/05) که پروتئینی سنتزی با طول 320-1 اسید آمینه است درون وکتور بیانی باکتریایی pET-28a تکثیر و کلون گردید. سپس پروتئین HA1 متصل به تگ هیستیدین در باکتری اشریشیا کولای سویه BL21 تحت القای IPTG با غلظت 1 میلی مولار بیان شد. بیان پروتئین با مطالعه مدت زمان‌های مختلف جهت القای IPTG بهینه سازی گردید و با کاربرد ستون نیکل مورد تخلیص قرار گرفت. وزن مولکولی پروتئین با استفاده از تکنیک وسترن بلات و کاربرد آنتی بادی مونوکلونال بر علیه تگ هیستیدین 40 کیلو دالتون تخمین زده شد و وزن حاصله هیچ تفاوتی با وزن مولکولی محاسبه شده نشان نداد. از این نظر که اکثر سایت‌های آنتی ژنی در دامین HA1 پروتئین HA قرار دارند، استفاده از این دامین ویروس آنفلوانزا جهت تولید واکسن دارای اهمیت قابل توجهی است. قابلیت القای تولید آنتی بادی بر علیه HA1 بیان شده در سلول‌های باکتری همچنین توسط آنالیز الیزا مورد بررسی قرار گرفت. پس از پروسه ایمنی‌زایی خرگوش‌ها، HA1 الیگومریک توانست آنتی بادی‌های خنثی کننده قابل توجه و سطوح بالایی از پاسخ‌های ایمنی را القا نماید. نتایج این تحقیق پیشنهاد می‌کند که واکسن‌های مبتنی بر HA1 به طور موثری در سیستم‌های باکتریایی تولید می‌شوند و می‌توانند به آسانی در شرایط بروز پاندمی‌های ویروس آنفلوانزا مورد استفاده قرار گیرند.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Expression of HA1 antigen of H5N1 influenza virus as a potent candidate for vaccine in bacterial system
چکیده انگلیسی مقاله The impending influenza virus pandemic requires global vaccination to prevent large-scale mortality and morbidity, but traditional influenza virus vaccine production is too slow for rapid responses. In this study, bacterial system has been developed for expression and purification of properly folded HA1 antigen as a rapid response to emerging pandemic strains. Here, a recombinant H5N1 (A/Indonesia/05/05) hemagglutinin globular domain, the synthesized HA1 (1-320 amino acids), was amplified and cloned into pET-28a bacterial expression vector. Then, his-tagged HA1 protein was expressed in Escherichia coli BL21 under 1 mM IPTG induction. The protein expression was optimized under a time-course induction study and further purified using Ni-NTA chromatography. Migration size of protein was detected at 40 KDa by Western blot using anti-His tag monoclonal antibody and demonstrated no discrepancy compared to its calculated molecular weight. Since most antigenic sites are in the HA1 domain of HA, using this domain of influenza virus as antigen is of great importance in vaccine development. The ability of the antibody stimulation against HA1 expressed in bacterial cells is also examined using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) analysis. Upon immunization of rabbits, oligomeric HA1 elicited potent neutralizing antibodies and high levels of serum antibody binding to HA1. Our findings suggest that HA1-based vaccines can be produced efficiently in bacterial systems and can be easily upscaled in response to a pandemic influenza virus threat.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله علی اصغر فرساد | a s
ph.d. student in plant biotechnology, department of biotechnology and plant breeding, faculty of agriculture, ferdowsi university of mashhad, mashhad, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه فردوسی (Ferdowsi university)

s ملک زاده شفارودی | malekzadeh shafaroudi
department of biotechnology and plant breeding, faculty of agriculture, ferdowsi university of mashhad, mashhad, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه فردوسی (Ferdowsi university)

n مشتاقی |
department of biotechnology and plant breeding, faculty of agriculture, ferdowsi university of mashhad, mashhad, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه فردوسی (Ferdowsi university)

f فتوحی |
influenza research lab, pasteur institute of iran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

s زیبایی |
razi vaccine and serum research institute, mashhad, iran
سازمان اصلی تایید شده: موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی (Razi vaccine and serum research institute)

نشانی اینترنتی http://ijvr.shirazu.ac.ir/article_3908_14540320addaf8c994b014fc718fa9ff.pdf
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/467/article-467-313664.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات