این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله سازمان نظام پزشکی جمهوری اسلامی ایران، جلد ۳۴، شماره ۳، صفحات ۰-۰
عنوان فارسی طراحی و ساخت کنترل داخلی جهت تشخیص یرسینیا پستیس بوسیله PCR
چکیده فارسی مقاله زمینه: یرسینیا پستیس، عامل طاعون، باکتری گرم منفی، غیر متحرک و کند رشد متعلق به خانواده انتروباکتریاسه می باشد. بر اساس طبقه بندی CDC این باکتری به دلیل نرخ بالای مرگ و میر و انتقال آسان انسان به انسان در دسته A عوامل بیوتروریسمی قرار گرفته است. علی الرغم حساسیت و دقت بالای PCR، ممکن است نتایج منفی کاذب به علت وجود مهارکننده موجود در نمونه های بالینی مشاهده شود. هدف از این مطالعه ساخت کنترل داخلی جهت تشخیص اختصاصی یرسنیا پستیس می باشد. روش کار: در این پژوهش، پرایمر های تشخیصی بر اساس ناحیه حفاظت شده ای از ژن هایcaf1 و pla توسط نرم افزار Allele ID 7.6 طراحی گشت. پرایمرهای هیبرید برای کنترل داخلی با استفاده از توالی ژن AOX1 مخمر پیکیا پاستوریس و ژن هدف طراحی شد. واکنش PCR بر روی DNA ژنومیک یرسینیا پستیس انجام گشت. محصول آن جهت ساخت کنترل داخلی در وکتور pTZ57R/T قرار گرفت. سپس، عملکرد کنترل داخلی توسط پرایمرهای تشخیصی مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: در الکتروفورز محصول PCR ژن هایcaf1 و pla به ترتیب باندهایی به طول 117 و 136 جفت باز و نتیجه تکثیر کنترل داخلی caf1-IC و pla-IC به ترتیب قطعاتی با طول 227 و 250 جفت باز رویت گردید، بنابراین محصول کنترل داخلی از نظر اندزه اختلاف مناسبی با محصول ژن های هدف دارا می باشد. نتیجه گیری: نتایج نشان داد کنترل مثبت داخلی ابزاری موثر برای جلوگیری از ننتایج منفی کاذب و تایید صحت نتایج می باشد. واژگان کلیدی: یرسینیا پستیس، طاعون، PCR، کنترل داخلی
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Design and construction of an internal control for detection Yersinia pestis using PCR
چکیده انگلیسی مقاله Background: Yersinia pestis, a Gram-negative, non-motile and Slow growth bacterium belonging to the Enterobacteriaceae family, is the causative agent of plague. It has been classified by CDC in group A of bioterrorism agents due to its high morbidity and mortality and easy person to person dissemination. In spite of sensitivity and High accuracy PCR, false negative results can occur due to the presence of inhibitors in clinical sample. The aim of this study was to construction an internal control for the specific detection of Y.pestis. Methods: In this study, The diagnostic primers for the F1 capsule antigen gene (caf1) and the plasminogen activator gene (pla) were designed using Allele ID 7.6 software. our target region was a conserved fragment in the pla and caf1 genes of Y. pestis. The composit primers for IC were designed using Pichia pastoris AOX1 gene sequences and target gene. The PCR experiment was performed on genomic DNA of Y.pestis. The product was cloned in the pTZ57R/T vector to construct a internal control. Then, the internal control function was evaluated By using diagnostic primers. Findings: The PCR products of the pla and caf1 genes were 136bp and 117bp respectively on electrophoresis gel and length of IPC were 225bp and 227bp respectively, so there was a significant different between their size. Conclusion: The results indicate that the IC effective tool for avoid false negative results and confirm the results. keyword: Yersinia pestis, plague, PCR, internal control
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله
نشانی اینترنتی http://jmciri.ir/browse.php?a_code=A-10-1-1987&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله دریافت فایل مقاله
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده عمومی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات